金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基的原理及操作步驟介紹
金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基是用于金黃色葡萄球菌的分離和初步鑒別??商娲鷤鹘y(tǒng)的高鹽甘露醇及血平板培養(yǎng)基,具有較高的特異性、靈敏度,可消除假陰性及假陽性;肉眼觀察菌落顏色即可用于金葡菌的初步鑒定,在此培養(yǎng)基中添加妥布霉素或甲氧西林等抗生素,可篩選耐甲氧西林金葡菌(MRSA);培養(yǎng)基的配置簡單,煮沸即可,無須高壓滅菌;操作簡便,劃線接種,37?C培養(yǎng),24小時出結(jié)果;是臨床檢測、食品工業(yè)、化妝品工業(yè)的好幫手。
檢驗原理:
蛋白胨、大豆胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;顯色劑與金黃色葡萄球菌具有的酶發(fā)生特異性反應,水解底物,釋放出顯色基團,在無色透明平板上,金黃色葡萄球菌產(chǎn)生粉紅-紫紅的邊緣整齊菌落;抑菌劑可抑制雜菌的生長。
用法:
稱取金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基17.26g加入200ml蒸餾水,加熱*溶解,煮沸2-3min,冷至50℃左右時,傾入無菌平皿,備用。
操作步驟:
涂布法:
1、按國家標準、SN標準、ISO標準或其它方法制備樣品液;
2、取1ml適宜稀釋度的樣品液加入表面干燥的金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基平板中心,每個稀釋度做2個平板;
3、以L形玻璃棒將樣品液涂布于瓊脂表面,避免涂到平板邊緣,將平板正置直至樣品液被培養(yǎng)基吸收;
4、平板倒置放入培養(yǎng)箱36℃培養(yǎng)18-24h,典型的金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基為凸起的藍綠色菌落;
5、計數(shù)平板上所有凸起的藍綠色菌落。
劃線法:
1、按國家標準、SN標準、ISO標準或其它方法制備樣品液;
2、取10ul-20ul樣品液劃線接種于已凝固好的金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基平板上;
3、倒置放入培養(yǎng)箱36℃培養(yǎng)18-24h,典型的葡萄球菌顯色培養(yǎng)基為凸起的藍綠色菌落;
注意:金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基鏡檢為革蘭氏陽性球菌,且兔血漿凝固酶試驗為陽性。